Page 40 - หนังสือที่ระลึก สิรินเด้นท์ มหิดล for ebook

วิธีการทดสอบประสิทธิภาพการฆ่าเชื้อจุลินทรีย์
โดยวิธี Agar well diffusion test
การทดสอบใช้อาหารวุ้นเลี้ยงเชื้อ Brain Heart Infusion agar
ที่เตรียมในจานเลี้ยงเชื้อให้มี ความหนา 5 มิลลิเมตรนำาเชื้อแต่ละชนิดมา
ปรับความขุ่นของเชื้อให้ได้ความขุ่นมาตรฐาน Mac Farland No. 0.5
จากนั้นหยดเชื้อปริมาตร 100 ไมโครลิตรลงบนผิวอาหารวุ้นเลี้ยงเชื้อชนิดละ
1 จาน แล้วใช้ไม้พันสำาลีทาเชื้อให้ทั่วจานจากนั้นเจาะหลุมในอาหารเลี้ยงเชื้อ
ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 6 มิลลิเมตร จำานวน 2 หลุม เว้นระยะห่างระหว่าง
หลุม ประมาณ 20 มิลลิเมตร เพื่อใส่ยาสีฟันและ 0.12% คลอเฮกซิดีน
อย่างละหลุม ๆ ละ 40 ไมโครลิตร ในการทดสอบแต่ละครั้งจะทำาซำ้า 3 จาน
นำาจานอาหารเลี้ยงเชื้อไปบ่มที่อุณหภูมิ 37 °C เป็นเวลา 24-48 ชั่วโมง
ตรวจสอบวงยับยั้งเชื้อ (inhibition zone) รอบหลุม วัดขนาดเส้นผ่าน
การทดสอบ คุณสมบัติของยาสีฟันสมุนไพร ศูนย์กลางของวงยับยั้งเชื้อทั้ง 3 จาน หน่วยเป็นมิลลิเมตรและทำาการ

นํ้ามันมะพร้าว ที่มีผลต่อเชื้อที่ทําให้เกิดโรคในช่องปาก ทดสอบซำ้าอีก 2 ครั้ง
วิธีการวิเคราะห์ข้อมูล ประสิทธิภาพการฆ่าเชื้อของยาสีฟัน
การทดสอบประสิทธิภาพการฆ่าเชื้อของยาสีฟันสมุนไพร แสดงเป็นค่าเฉลี่ยวงยับยั้งเชื้อที่เกิดขึ้น
นำ้ามันมะพร้าวสิรินเด้นท์
วัสดุและวิธีการ
การเตรียมเชื้อจุลินทรีย์ที่ใช้ทดสอบ
เชื้อจุลินทรีย์ที่ใช้ทดสอบ 6 ชนิด ได้แก่ เชื้อก่อโรคฟันผุสามชนิด
คือ Streptococcus mutans สายพันธุ์ ATCC 25175, Streptococcus
sobrinus สายพันธุ์ ATCC 6715, Lactobacillus casei สายพันธุ์
ATCC 334 เชื้อก่อโรคปริทันต์อักเสบสองชนิด ได้แก่ Aggregatibacter
actinomycetemcomitans สายพันธุ์ ATCC 43718, Porphyromonas
gingivalis สายพันธุ์ ATCC 53978 และเชื้อราก่อโรคในช่องปากหนึ่งชนิด
ได้แก่ Candida albicans สายพันธุ์ ATCC 10231 เชื้อ S. mutans,
S. sobrinus, L. casei, A. actinomycetemcomitans, C. albicans
เพาะเลี้ยงเชื้อบน Brain heart infusion agar บ่มที่อุณหภูมิ 37 °C
ใน 5% CO incubator เป็นเวลา 48 ชั่วโมง นำาโคโลนีเชื้อ 3-5 โคโลนี
2
เพาะเลี้ยงยังใน Brain heart infusion broth และบ่มที่อุณหภูมิ 37 °C
ใน 5% CO incubator เป็นเวลา 24 ชั่วโมงสำาหรับเชื้อ P.gingivalis
2
เพาะเลี้ยงบน Blood agar ที่เติม hemin และ vitamin K บ่มที่อุณหภูมิ 37 °C
ในบรรยากาศไร้ออกซิเจน (anaerobic atmosphere) นำาโคโลนีเชื้อ 3-5
โคโลนี เพาะเลี้ยงใน Brain heart infusion broth ที่เติม hemin และ
vitamin K บ่มที่อุณหภูมิ 37 °C ในบรรยากาศไร้ออกซิเจน (anaerobic
atmosphere) เป็นเวลา 24 ชั่วโมง

22 ยาสีฟันสมุนไพรน้ำามันมะพร้าว